引物稀释,干粉引物怎么稀释到工作液?

2022-01-08 20:02:06 百科大全 投稿:一盘搜百科
摘要先离心!然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液(约100μM),保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物浓度不宜偏高,浓度过高有两个弊端引物

先离心!然后加入适量的水或TE溶解。一般配制成较高浓度的母液(约100μM),保存于-20℃。使用前取出其中一部分用ddH2O配制成10μM或20μM的工作液。引物浓度不宜偏高,浓度过高有两个弊端引物稀释:一是容易形成引物二聚体(primer-dimer),二是当扩增微量靶序列并且起始材料又比较粗时,容易产生非特异性产物。一般说来,用低浓度引物不仅经济,而且反应特异性也较好。一般终浓度用0.25-0.5pM/μl较好。1 引物的分子量如何计算? 比如:AAGCTTTTACCGC的分子量是多少?2 OD值,1个OD值是不是等于40UG。3 质量数,质量数的含义是什么,怎么计算?4摩尔数(μmol)和终浓度(pM)和稀释水量(μl)是不是计算稀释引物都要用到以上四点的各个参数?具体的公式是什么呢?合成引物的单子上应该有算法:1OD=33ug1个碱基的分子量=324.5(以上为近似值,通常都这样用)1条引物的分子量=碱基数*324.5质量数=OD*33ug摩尔数=质量数/分子量先离心的原因是什么?因为引物合成后是干粉状的,在运输过程中可能会沾到管壁或管盖上,直接打开有些粉末可能会飘出去,引物的量就减少了。先离心使粉末都到管底,可以避免这种现象的发生。然后根据以下公式可计算出所加双蒸水的量33nmol/OD×管上所标OD值×100是为10pmol/ul浓度的引物溶液,还可以由此推算其它浓度所需的双蒸水量。可于-20度保存。订引物回来的说明书背面一般都有引物稀释计算的说明的.注意分装!

引物稀释,干粉引物怎么稀释到工作液?插图

声明:一盘搜百科所有作品(图文、音视频)均由用户自行上传分享,仅供网友学习交流。若您的权利被侵害,请联系 88888@qq.com